大鼠血鈣ELISA試劑盒酶聯(lián)免疫分析
ELISA試劑盒性能
準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值,大于等于0.9900。
特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
elisa試劑盒特點
1.專一性強。抗原與抗體的免疫反應是專一反應,而免疫酶技術以免疫反應為基礎,所檢測的對象是抗原或抗體,使用的抗體除標記了酶以外,與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應,顯示抗原與抗體的結合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。
3.樣品易保存。經(jīng)過酶反應顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
4.結果易觀察。對檢測結果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計進行比色測定,還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測物的顯示。
5.可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì),應用酶免吸附技術進行比色測定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進行免疫酶技術的定量測定。
6.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進行檢測,免疫酶技術都能在較短時間內(nèi)完成。
7.儀器和試劑簡單。對免疫沒技術來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實驗室及生產(chǎn)應用單位均易購置.
計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度
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操作技巧:
A、加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
B、合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
C、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
D、要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。
E、樣品稀釋液應用加液器加注,并經(jīng)常校對其準確性。
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