根據(jù)實(shí)驗(yàn)物種及待檢樣品性質(zhì)來(lái)選擇科研ELISA試劑盒
如果實(shí)驗(yàn)君的實(shí)驗(yàn)樣品為人、小鼠或大鼠樣品，那么要選擇一個(gè)合適的試劑盒相對(duì)容易，但如果您的實(shí)驗(yàn)樣品來(lái)源于其他物種如雞、牛、猴等，則市面上能提供的試劑盒種類卻很少。且不可輕信能提供近萬(wàn)種試劑盒，覆蓋多物種的供應(yīng)商。但如果又非要檢測(cè)這些物種的指標(biāo)時(shí)，要對(duì)待檢物(如有種屬差異性)進(jìn)行同源性分析以及試劑盒的種屬交叉反應(yīng)數(shù)據(jù)。對(duì)于樣品類型而言，一般的商業(yè)化試劑盒都經(jīng)過(guò)血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液的驗(yàn)證。在選擇試劑盒時(shí)，要詳細(xì)閱讀說(shuō)明書，比如血漿樣本抗凝劑的使用是否與試劑盒兼容。另外，在某些情形下樣品中會(huì)存在干擾因素比如溶血血漿、高脂肪含量的樣品、人抗鼠抗體(HAMA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清中含胎牛血清等。因此需根據(jù)樣品來(lái)選擇試劑盒，必要時(shí)還要根據(jù)樣本來(lái)適當(dāng)優(yōu)化。或在樣品收集前，先閱讀一些可靠供應(yīng)商試劑盒的說(shuō)明書或直接咨詢。如果您的樣品為組織或細(xì)胞裂解物，則需要更謹(jǐn)慎的選擇試劑盒。市面上大多數(shù)的商業(yè)化試劑盒沒(méi)有經(jīng)過(guò)多種來(lái)源組織樣本的驗(yàn)證。這需要實(shí)驗(yàn)君能理解不是所有試劑盒所用的抗體對(duì)，都能特異的從一堆裂解物蛋白中特異檢出您的目的蛋白，還要考慮組織樣品的基質(zhì)效應(yīng)(Matrix Effect)等。但如果實(shí)驗(yàn)君要了解組織樣品的制備問(wèn)題，我們另起一文來(lái)總結(jié)。
根據(jù)樣品中檢測(cè)物水平來(lái)選擇科研ELISA試劑盒
如果實(shí)驗(yàn)君對(duì)于樣品中待檢物的水平?jīng)]有任何可參考的數(shù)據(jù)，選擇寬動(dòng)力學(xué)檢測(cè)范圍的試劑盒。如果樣品中待檢物的含量很低，建議選擇高靈敏度的試劑盒。為了降低基質(zhì)效應(yīng)，有必要用稀釋液至少做2倍稀釋。如果樣品中待檢物含量遠(yuǎn)超過(guò)試劑盒的檢測(cè)范圍（標(biāo)曲范圍）， 也需做適當(dāng)?shù)谋稊?shù)稀釋。在zui后計(jì)算結(jié)果時(shí)，需乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
根據(jù)樣本可獲得性來(lái)選擇科研ELISA試劑盒
通常而言，商業(yè)化試劑盒的樣品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供應(yīng)商的試劑盒對(duì)樣品的用量要求可少至10ul。如果您的樣品很珍貴或較難獲取，則需要認(rèn)真考慮試劑盒對(duì)樣品用量的要求。如果樣品量少，且要做多因子檢測(cè)時(shí)更需謹(jǐn)慎。
細(xì)致比較科研ELISA試劑盒關(guān)鍵性技術(shù)參數(shù)
ELISA試劑盒的關(guān)鍵技術(shù)參數(shù)包括板內(nèi)差異性、板間差異性、批間差異性、重復(fù)性、特異性及交叉反應(yīng)性、回收率等。如果實(shí)驗(yàn)君經(jīng)常開展ELISA實(shí)驗(yàn)，建議使用同一廠家的試劑盒，這樣可盡量保證數(shù)據(jù)的重復(fù)性(當(dāng)然前提是實(shí)驗(yàn)條件的一致性)。對(duì)于科研用的定量ELISA試劑盒，不同的生產(chǎn)廠家使用的抗體對(duì)、酶以及底物、生產(chǎn)工藝和研發(fā)實(shí)力不盡相同，自然不同廠家試劑盒測(cè)出的數(shù)據(jù)會(huì)有差異。